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细菌内毒素检查法

  来源:中国药典2000年版二部附录          日期:2006-06-10

  供试品干扰试验

  按“鲎试剂灵敏度复核”项下试验,用供试品的最大有效稀释液将细菌内毒素国家标准品或工作标准品制成2.0λ<[b]>、λ<[b]>、0.5λ<[b]>、0.25 λ<[b]>浓度稀释液。供试品的最大有效稀释倍数(D)按下式计算:

  D=L/λ<[b]>  L为供试品的细菌内毒素限值,EU/ml。

  如果有供试品和无供试品测得的鲎试剂灵敏度(λ<[c]>)在0.5~2.0λ<[b]>(包括0.5λ<[b]>和2.0λ<[b]>)时,则认为供试品在该浓度下不干扰试验,否则需进行适当处理后重复本试验。使用更灵敏的鲎试剂,对供试品进行更大倍数稀释,是排除干扰因素的简单有效的方法。

  检查法

  取装有0.1ml鲎试剂溶液的10×75mm试管(或0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿)4支,其中2支加入0.1ml供试品作为供试品管,1支加入2λ<[b]>内毒素工作标准品溶液0.1ml作为阳性对照管,1支加入细菌内毒素检查用水①0.1ml作为阴性对照管。将试管中溶液轻轻混匀后,封闭管口,垂直放入37±1℃水浴中,保温60±2分钟。保温和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果。

  结果判断

  将试管从水浴中轻轻取出,缓缓倒转180°时,管内凝胶不变形,不从管壁滑脱者为阳性,记录为(+);凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性,记录为(-)。供试品两管均为(-),应认为符合规定;如两管均为(+),应认为不符合规定;如2管中1管为(+),1管为(-),按上述方法另取4支供试品管复试,4管中有1管为(+), 即认为不符合规定。阳性对照为(-)或阴性对照为(+),试验无效。

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  ①细菌内毒素检查用水系指与使用批号鲎试剂4小时不产生凝集反应的注射用水。



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