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无菌检查法

  来源:中国药典2000年版二部附录          日期:2006-06-10

  3.选择性培养基

  (1) 对氨基苯甲酸培养基(用于磺胺类药物的无菌检查)

  照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方及制法,各加对氨基苯甲酸0.125g,溶解后摇匀,分装,115℃灭菌30分钟。

  (2) 吐温培养基(用于油剂药品的无菌检查)

  照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方及制法,各加10ml的吐温80,摇匀后,分装,115℃灭菌30分钟。

  4.营养肉汤培养基

  胨

  10g

  肉浸液

  1000ml

  氯化钠

  5g

  取胨与氯化钠,加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。

  5.营养琼脂培养基

  照上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。

  6.0.5%葡萄糖肉汤培养基

  胨

  10g

  葡萄糖

  5g

  氯化钠

  5g

  肉浸液

  1000ml

  取胨与氯化钠加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,加葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2, 分装,115℃灭菌30分钟。

    7.霉菌琼脂培养基

  照霉菌培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为6.4±0.2,分装,115℃灭菌20分钟,趁热斜放使凝固成斜面。

  上述培养基分别按15ml与40ml分装于试管中,装量约为试管高度的2/5,在115℃灭菌30分钟。细菌培养基经30~35℃培养48小时,霉菌培养基经20~25℃培养72小时后,应无菌生长。

  培养基的质量应通过灵敏度检查。

  培养基灵敏度检查法

  1.菌种

  (1)藤黄微球菌(Micrococcus Lutea)[CMCC(B)28001]

  (2)生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B)64941]

  (3)白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001]            

  2.操作

  3.结果判定

  以接种后培养基管数的2/3以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度(且接种菌量均应小于10个),三次试验中,以两次达到的最高灵敏度为判定标准。

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