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高效液相色谱法

  来源:中国药典2000年版二部附录          日期:2006-06-10

  (3) 内标法测定供试品中杂质的总量限度

  采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图I;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则应调整注样量或检测器灵敏度。

  如果色谱图Ⅰ中没有与色谱图Ⅱ上内标峰保留时间相同的杂质峰,则色谱图Ⅱ中各杂质峰面积之和应小于内标物质峰面积(溶剂峰不计在内)。如果色谱图Ⅰ中有与色谱图Ⅱ上内标物质峰保留时间相同的杂质峰,应将色谱图Ⅱ上的内标物质峰面积减去色谱图Ⅰ中此杂质峰面积,即为内标物质峰的校正面积;色谱图Ⅱ中各杂质峰总面积加色谱图Ⅰ中此杂峰面积,即为各杂质峰的校正总面积,各杂质峰的校正总面积应小于内标物质峰的校正面积。

  (4)内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量

  按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物质,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液,取一定量注入仪器,记录色谱图,测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子:

          A<[s]>/m<[s]>

  校正因子(f)=───────

          A<[r]>/m<[r]>

  式中

  A<[s]>为内标物质的峰面积或峰高;

  A<[r]>为对照品的峰面积或峰高;

  m<[s]>为加入内标物质的量;

  m<[r]>为加入对照品的量。

  再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图,测量供试品(或其杂质)峰和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算含量:

            A<[x]>

  含量(m<[x]>)=f×───────

            A<[s]>/m<[s]>

  式中

  A<[x]>为供试品(或其杂质)峰面积或峰高;

  m<[x]>为供试品(或其杂质)的量;

  f、A<[s]>和m<[s]>的意义同上。

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