王晨 邵君飞 杨亚安 2005-12-13 13:19:13 中华医药杂志 2003年6月第3卷第6期
【摘要】 目的 探讨不育男子精液中抗精子抗体与精子凋亡的关系。方法 应用流式细胞术（FCM）检测30例正常生育组与50例不育男子精液中抗精子抗体和精子凋亡的情况。结果 生育组和不育组间抗精子抗体（ASA）阳性检出率、精子凋亡率（PAS）分别为3.33%、34.0%和4.12±1.33%、19.31±5.67%，两者间差异有显著性（P<0.01），且精子凋亡率与抗精子抗体阳性检出率呈正相关。结论 精子凋亡与男性不育有着十分密切的关系，检测精子凋亡为临床评估男性生育力提供了新方法。
关键词 抗精子抗体（ASA） 精子凋亡（PAS）
细胞凋亡（apoptosis，AP），即程序化细胞死亡，是多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定、由基因控制的细胞主动死亡过程。通过细胞凋亡，清除体内多余的衰老细胞，以维持细胞在数量、形态和功能上的平衡。研究表明细胞凋亡的失控与许多疾病的发生有关 ［1～3］ 。本文运用FITC-Annenix V/PI荧光染色结合流式细胞术（flow cytomeˉtry，FCM）检测生育组与不育组男子精液中抗精子抗体与精子凋亡的情况，探讨抗精子抗体与精子凋亡的关系，以建立一种评估男性生育力的新方法。
1 材料和方法
1.1 研究对象 （1）生育组:已生有一子或一女的健康男子30例，年龄24～35岁，平均28.3岁。（2）不育组:原发性或继发性不育男子50例，不育期3～10年，年龄25～35岁，平均27.8岁。
1.2 材料 异硫氰酸荧光素（FITC）标记的Annenix V细胞凋亡试剂（美国Becton Dickinson公司）。孵育缓冲剂:10mmol/L HEPES，pH7.4，140mmol/L NaCl，2.5mmol/L CaCl 2 ，PBS液:8g/L NaCl，0.2g/L KCl，1.44g/L Na 2 HPO 4 ·7H 2 O，0.24g/L KH 2 PO 4 ·H 2O，pH7.2。流式细胞仪（FCM，型号:EPICS-XL，USA）。
1.3 方法
1.3.1 精液标本的收集 禁欲3～5天，手淫法收集全部精液于无菌玻璃容器中，置37℃恒温箱中待液化后，1500rpm离心，分离精子、精浆，重复2次，将分离的精子、精浆冻存在-80℃冰箱内备用。
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