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不育男子精液中抗精子抗体与精子凋亡的相关性研究

    日期:2006-03-14

1.3.2 抗精子抗体测定 ELISA间接法以1∶20稀释待检精浆100μl加入96孔微量反应板,37℃,1h后,PBS洗涤3min×3次后,加入1∶1000HRP-羊抗人IgG100μl,37℃,40min,PBS洗涤3min×3次后,每孔加入OPD-H 2 O 2 显色剂100μl,15min,用2M H 2 SO 4 终止反应。以DG-3022A型酶联免疫检测仪,492nm波长测定OD值,以阴性对照OD值X±3D确定为阳性。

1.3.3 精子凋亡的检测 将精子标本置冰水中复温,用冷 PBS液稀释精子悬液,取1×10 6 个精子于试管内,加PBS液洗涤,离心,去上清,重复一次,用孵育缓冲液1ml重悬浮,取100μl放入试管中,加入FITC-Annenix V10μl和PI0.3μg染色,室温下避光静置15min后加400μl孵育缓冲液,用FCM检测,阴性对照组孵育缓冲液中不加钙离子。

1.3.4 统计学处理 采用SPSS10.0统计软件包进行t检验、q检验及相关分析。

2 结果

生育组与不育组ASA阳性检出率、PAS的比较,见表1。

表1 生育组与不育组ASA阳性检出率、PAS的比较

统计学分析表明:不育组与生育组间抗精子抗体阳性检出率、精了凋亡率差异存在显著性(P<0.01),且抗精子抗体阳性率与精子凋亡率呈正相关。

3 讨论

 参考文献

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