二、标本收集、制备和检测方法
血浆标本采用抗凝静脉血3 ml，离心(2000 r/min, 15 min)，取上层血浆1 ml，中耳 积液标本在严格无菌下鼓膜穿刺抽出积液，均行封口、标记，存放-30℃冻存待测。
NO含量测定试剂盒由军事医学科学院放射医学研究所提供。按规定方法检测标本；采用上海第三分析仪器厂721分光光度计545 nm比色读吸光度(A)值，根据样品吸光度值，按标准曲线计算NO含量。
IL-8及TNF-α含量测定试剂盒均由第四军医大学免疫教研室提供，按酶联免疫吸附试验法测定，采用美国Syntron MPR2100 Elisa读数仪测410 nm处吸光度值，绘制标准曲线，根据样品吸光度值，计算IL-8和TNF-α含量。
当测得的含量大于最低标准含量时定为阳性(IL-8＞0.156 ng/ml、TNF-α＞0.156 ng/ml 、NO＞0.138 μg/ml)。计算平均含量时包括低于最低标准含量的数值。
统计学处理采用t检验。
结果
1．均衡性检验：将患者组和对照组的年龄、性别等进行对比检验，差异均无显著性 ( P＞0.05)。
2．IL-8、TNF-α、NO在中耳积液标本中阳性表达率：NO为100%(60/60)，IL-8为82 .2%(37/46)，TNF-α为71.4%(30/42)。
3．患者组和对照组血浆中和中耳积液中NO、IL-8及TNF-α水平：3者在中耳积液的 含量明显高于同组血浆含量；而后者又明显高于对照组血浆含量，均有统计学意义(表1)。
表1 患者组与对照组NO、IL-8、TNF-α含 量比较(
±s)
表2 病程与中耳积液中NO、IL-8、TNF-α 含量关系
文献报道分泌性中耳炎的早期中耳积液中病原体的检出率显著高于后期［8］。 由于病理 因素的持续刺激，中耳粘膜发生一系列病理变化，杯状细胞增多，分泌粘蛋白形成粘液性积 液。Rose等［1］通过研究小鼠中耳积液模型的粘蛋白的分泌，认为细菌脂多糖首先 诱导TNF- α分泌，继而促进NO合成，NO通过升高粘膜上皮细胞内环磷酸鸟苷（cGMP）的浓度使粘蛋白 分泌增多。本实验结果显示NO和TNF-α在粘液性中耳积液中的高表达，且呈正相关关系， 与上述结果符合。
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