1 材料和方法
1.1 肾组织标本制备[3] MsPGN组12例,男9例、女3例,平均年龄26.8岁。所选病例经肾活检、按1982年WHO制定的肾小球疾病形态学分类确诊为MsPGN。对照组8例,为男性移植肾供肾者,肾活检证实为正常肾组织。肾组织按参考文献[3]处理备用。
1.2 IL-6 mRNA原位杂交 参照参考文献[4]制备IL-6 cDNA探针(寡核苷酸特异探针序列由上海细胞生物研究所合成,DIG寡核苷酸3末端标记试剂盒购自BM公司)[4]。按蔡文琴法[3]将4℃多聚甲醛固定后的冰冻切片常规处理后行原位杂交,阴性对照以不加探针的杂交液同法操作。
1.3 IL-6、CIV和FN免疫组化染色 按参考文献[3]进行。兔抗人IL-6多克隆抗体购自美国Santa Gruze公司,鼠抗人FN、鼠抗人CIV以及三抗、二抗均购自北京中山生物试剂公司。
1.4 ECM嗜银染色 按常规进行。
1.5 半定量分析 采用EIG综合图象分析系统(重庆大学ICT中心)对照片上的阳性杂交信号或染色信号进行半定量分析。
1.6 统计学处理 用SPMP医用统计软件进行t检验和相关分析。数据以
±s表示。
2 结 果
详见表1~表4。
表1 MsPGN肾小球与正常肾小球内IL-6 mRNA表达的比较
(阳性信号面积占肾小球总面积百分比)