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系膜增殖性肾炎白细胞介素6表达与细胞外基质产生的研究

  来源:120online      日期:2007-05-04
肾脏病与透析肾移植杂志1999年第2期第8卷论著摘要作者:李开龙 朱妙珍 赵言明 倪 军单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科(重庆,400042)关键词:系膜增殖性肾炎;白细胞介素6;细胞外基质...

  系膜细胞增生、细胞外基质(ECM)聚积和扩张是系膜增殖性肾小球肾炎(MsPGN)发生发展的重要病理基础[1]。研究表明,系膜细胞可分泌具有生物活性的白细胞介素6(IL-6),IL-6又可促进系膜细胞生长[2]。人类MsPGN中IL-6的表达及其与ECM之间的关系国内外研究较少,我们观察了MsPGN患者肾小球内IL-6基因及蛋白表达状况,分析其与系膜扩张,系膜基质成分Ⅳ型胶原(CIV)和纤维连接蛋白(FN)之间的关系。

  1 材料和方法

  1.1 肾组织标本制备[3] MsPGN组12例,男9例、女3例,平均年龄26.8岁。所选病例经肾活检、按1982年WHO制定的肾小球疾病形态学分类确诊为MsPGN。对照组8例,为男性移植肾供肾者,肾活检证实为正常肾组织。肾组织按参考文献[3]处理备用。

  1.2 IL-6 mRNA原位杂交 参照参考文献[4]制备IL-6 cDNA探针(寡核苷酸特异探针序列由上海细胞生物研究所合成,DIG寡核苷酸3末端标记试剂盒购自BM公司)[4]。按蔡文琴法[3]将4℃多聚甲醛固定后的冰冻切片常规处理后行原位杂交,阴性对照以不加探针的杂交液同法操作。

  1.3 IL-6、CIV和FN免疫组化染色 按参考文献[3]进行。兔抗人IL-6多克隆抗体购自美国Santa Gruze公司,鼠抗人FN、鼠抗人CIV以及三抗、二抗均购自北京中山生物试剂公司。

  1.4 ECM嗜银染色 按常规进行。

  1.5 半定量分析 采用EIG综合图象分析系统(重庆大学ICT中心)对照片上的阳性杂交信号或染色信号进行半定量分析。

  1.6 统计学处理 用SPMP医用统计软件进行t检验和相关分析。数据以±s表示。

  2 结  果

  详见表1~表4。

表1 MsPGN肾小球与正常肾小球内IL-6 mRNA表达的比较

  (阳性信号面积占肾小球总面积百分比)

  (阳性信号面积占肾小球总面积百分比)

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