1.2.3 流式细胞术分析 细胞悬液样本经45μm尼龙膜滤入检测管。选用空气冷却氩离子激光管,激发波长488nm,功率250mW。测定前,用荧光小球(beads)校正仪器至前向散光和绿色荧光的CV%均在2%以下。冲洗样本管道后,输入样品,待测样品在气体压力下进入流动室,流动室内充满鞘液,鞘液用以裹携细胞。调节样品液与鞘液之间压力差为5~10Psi,使细胞样品液以稳定的层流通过检测喷嘴,由流动室喷嘴流出时形成单一的细胞液柱,液柱与高度聚焦的激光束垂直交汇。相交点即测量区。经过测量区的细胞被激发产生荧光。通过与入射光和液柱垂直方向的检测器、透镜、光阑、滤片等接收每个细胞与激光相遇后产生的荧光。(每份样本计数5 000个细胞)讯号输入计算机,经计算机处理得出各组分阳性细胞的百分率及总计细胞数。
2 结 果
CD3+CD16-T细胞计数见附图:以时间为横坐标,CD3+CD16-T细胞所占白细胞总数的百分率为纵坐标绘图。可见:经由猪肾(图中虚线)灌注的人血液中的CD3+CD16-T细胞在灌注开始时即锐减,由灌注前的67.8±3.4下降至32.4±2.1,下降了约52%;随着灌注时间的延长,其减少的趋势逐渐减弱,曲线呈饱和形式。而经由人肾(图中实线)的人血中CD3+CD16-T细胞灌注后各时间段与灌注前相比无明显变化。

附图 CD3+CD16-T细胞计数的变化
3 讨 论
异种器官移植中,对细胞免疫作用的了解远不及对体液免疫的作用了解得多。细胞免疫对异种移植物的破坏作用是肯定的[2]。但对其确切的机制知道得极少。在猪→人异种器官移植超急排斥反应中,主要为人血中天然抗体识别猪血管内皮细胞表面的糖蛋白或糖脂末端的α半乳糖残基并激活补体所致的移植物的不可逆损害[3~6]。一旦猪→人间异种移植超急排斥反应被克服,摆在人们面前的将是细胞免疫所带来的困扰,这是无法绕开和回避的重大课题。
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