1.1 材料来源 标本来自本院病理科保存的石腊包块,均取自于泌尿外科1985~1997年行同种异体肾移植患者。共10例,其中男7例,女3例,年龄24~45岁,术前诊断为尿毒症,基础病变为慢性肾小球肾炎。10例肾切除均系慢性排斥反应使移植肾丧失功能所致。移植肾存活时间为2~7年。
1.2 形态学观察
1.2.1 免疫组织化学染色 石蜡切片经二甲苯脱蜡,逐级酒精浸水后,常规ABC法染色。试剂为:Anti-human Tryptase mAb Biotin(Promega公司),avidin-HRP(北京军事医学科学院微生物研究室)DAB(Sigma公司)。
1.2.2 甲苯胺蓝复染 经ABC法染色的切片,PBS洗后,按文献[5]进行甲苯胺蓝染色。高倍镜(100×)下进行肥大细胞形态观察,至少计数200个细胞,并根据着色特点进行分类。
2 结 果
镜下观察到三种具有不同着色特征的细胞。分别为:甲苯胺蓝染色阳性细胞T+(不包括双阳性细胞),特点为细胞核淡蓝色,细胞浆呈蓝色,细胞浆颗粒呈深蓝紫色。Tryptase阳性细胞Tr+(不包括双阳性细胞),特点为细胞核淡黄色,细胞浆为棕黄色,细胞浆颗粒为深棕色。双重染色均阳性细胞T+/Tr+,特点为细胞浆呈蓝或棕色,细胞浆颗粒呈棕黑色,细胞核浅棕色或掺杂淡蓝色(见附图)。三种类型细胞数量占总肥大细胞数量的百分比依次为23.12%,8.05%,68.86%(见附表)。
附表 慢性排斥患者移植肾的肥大细胞染色结果(%)
3 讨 论
肥大细胞作为一种抗原呈递细胞[6],在免疫系统中的作用越来越受到人们的关注。现已证明,肥大细胞是由骨髓CD34阳性造血干细胞分化而来的一个独立的细胞系[7,8]。关于肥大细胞的亚类研究也已有报道。当前对于肥大细胞进行分类的方法主要有二种。一种是依据其在体内定居的特点,分为结缔组织型(CTMCs)与粘膜型(MMCs)。结缔组织型肥大细胞主要分布于皮肤结缔组织,腹腔浆膜,肌肉及血管,周围神经组织。粘膜型肥大细胞主要分布于呼吸道,小肠粘膜层[9,10]。
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