1 材料和方法
1.1 材料 豚鼠,6只,重250g,性别不限(第二军医大学实验动物中心);SD大鼠,30只,重250 g,雄性(上海计划生育研究所);手术显微镜(GX-SS,22-3;上海医用光学仪器厂);HCA离体肾脏保存液(上海市中心血站);肝素(上海生化试剂三厂);戊巴比妥钠(第二军医大学朝晖制药厂)。
1.2 方法
1.2.1 供肾切取 供鼠以戊巴比妥钠(50mg/kg体重)腹腔麻醉,仰卧固定,取腹部正中切口,切开皮肤、腹直肌和腹膜,用自制自动拉钩将腹壁拉向两侧,暴露腹腔内脏器;将肠管推向两侧,充分暴露双侧肾脏及所属区域动脉和静脉。
1.2.2 供肾血管游离 使用棉签和显微镊钝性分离双侧肾动脉、静脉及其分支,游离和其连接的腹主动脉及下腔静脉,除去血管外膜外脂肪和结缔组织,0号丝线结扎分支血管,保留双侧肾动脉、肾静脉及输尿管;于右肾静脉上方以0号丝线围绕下腔静脉、于左肾动脉下方以0号丝线围绕腹主动脉,暂不结扎。
1.2.3 原位灌注 结扎右肾静脉上方的下腔静脉,结扎左肾动脉上方的腹主动脉。轻轻提起左肾动脉下方腹主动脉围绕线,于提起处远端用眼科剪剪一向心端斜切口(腹主动脉勿切断),向心方向插入自制灌注管,同一水平切开下腔静脉,用0~4℃ hCA肾保存液(内有少许肝素)原位灌注双侧肾脏,至双肾体表面灰白,肾静脉流出的灌注液清亮为止。整块切取双肾及输尿管,注意适当保留输尿管周围结缔组织。
1.2.4 供肾修整 0~4℃下修整双肾,左肾静脉于腹腔静脉根部结扎离断;于右肾静脉上方结扎下腔静脉、下方保留一段下腔静脉备吻合用。双肾动脉各留一片Carrels瓣后与腹主动脉分离。
1.2.6 观测方法 显微镜下由输尿管口观察移植肾的泌尿情况。以停止泌尿1 h以上为发生排斥反应。此时切除移植肾行病理检查。
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