RT－PCR方法对检测乳腺癌干细胞富集血残存肿瘤细胞的价值

　　1％琼脂糖凝胶（含0.5μg/mlEB）电泳，紫外灯下观察结果并照相。

　　2　结果

　　2.1　特异性

　　MUC1、K19基因在乳腺癌细胞系MCF－7中表达阳性，而在淋巴细胞中则未见表达（图1）。

1-淋巴细胞 2-MCF-7 3-PCR Meker

1　MUC1、K19、β－actin在乳癌细胞系MCF－7、淋巴细胞中的表达情况

　　2.2　灵敏度

　　通过细胞稀释检测该方法的灵敏度，在10⁷淋巴细胞中分别加入10⁵、10⁴、10³、10²、10¹乳腺癌细胞，前4组为阳性结果，证明当10⁷淋巴细胞中至少有102乳腺癌细胞时，RT－PCR方法可检测到，即该方法的灵敏度可达1/10⁵（图2）。

图2　用稀释法比较MUC1和K19基因的检测灵敏度

　　2.3　外周血干细胞移植富集血中残存病灶检测情况

　　15例乳腺癌患者中有2例检测结果为阳性(图3)。

图3　外周血干细胞中MUC1、K19、β－actin的表达情况

　　3　讨论

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