在自体外周血干细胞移植中，检测富集血中残存的肿瘤细胞，对阳性样品进行纯化，指导相应的治疗，以降低移植后的复发率，延长患者的生存期有重要意义。进行这方面的工作，无疑对检测方法提出了较高的要求。近几年，国外多应用RT－PCR方法检测淋巴结中肿瘤细胞的转移情况[3～5]。而我们为找到一种有较高特异性的肿瘤生物标记，选用了MUC1、K19基因的表达情况作为检测指标。
因为是检测富集血中的残存肿瘤细胞，所以要求目的基因必须在乳腺癌细胞中表达，而在血细胞（主要是淋巴细胞）中不表达。我们采用了两个组织特异性标记－MUC1、K19，MUC1编码上皮粘蛋白，K19编码上皮角蛋白，二者均存在于目前已知的几乎所有类型的乳腺癌细胞中。在许多其它的上皮组织及其癌细胞中，亦可见MUC1和K19的表达，如肺癌、前列腺癌等。从我们已完成的实验也验证了这一点。乳腺癌细胞系MCF－7中MUC1和K19表达均为阳性，而在淋巴细胞中则未见表达。此外，要从大量的富集血淋巴细胞中检测出极微量的肿瘤细胞，对灵敏度有极高的要求。经本实验证明，用RT－PCR法对MUC1和K19的检测灵敏度可达1/105。在这方面，RT－PCR较之传统的免疫组化等方法具有了更大的优越性[6,7]。
在建立起较成熟的实验方法基础上，我们检测了15例乳腺癌患者干细胞移植富集血中的残存瘤细胞，有2例为阳性结果，至于其预后的效果尚待进一步的观察。
综上所述，RT－PCR是检测外周血干细胞富集血中残存瘤细胞的切实可行的方法，有助于提高移植的安全性，延长生存期。
作者单位：天津医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所免疫研究室(天津市300060）
参考文献
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2 Antaman K,Corringham R,de Vries E,et al. Dose intensive therapy in breast cancer. Bone Marrow Transplant,1992;10(Suppl 2):67
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