三、观察 正常情况下接种15小时后，大部分细胞贴壁，24小时后细胞伸出粗细不等的突起。随后胞体逐渐增大，突起伸长变粗，有的还发出分枝互相联络，交织成网，光晕明显且不断扩大。16天到24天为生长高潮，生长晕趋于稳定，细胞成熟。随后细胞数减少，空泡变性细胞开始出现，30天时间明显观察到突起减少缩短，光晕减弱，甚至细胞变性死亡。
某些物质对原代培养的神经细胞的影响
在原代培养过程中，多种物质如神经生长因子（NGF）、脑活素(cerebrolysin)、胶质细胞成熟因子（GMF）、一氧化氮（NO）、氨（NH3）、细胞因子及多种金属离子（如Zn2+,Ca2+）等对神经细胞的存活、生长、发育、形态、功能及衰老死亡等有不同程度的影响。其影响程度与其对正常生理状态下的神经细胞的影响极其相似。因此，深入研究多种物质对原代培养的神经细胞的影响，将有助于弄清许多过去未能解释清楚的病理生理现象，并为神经系统病症的预防、治疗及探讨其发病机制提供新的思路和手段，具有重要的理论意义和应用价值。
一、NGF NGF是迄今为止研究最为广泛且深入的一种营养因子。以往人们认为CGF仅对周围神经系统的交感和感觉神经元起作用，而且作用产生于某一发育阶段。实际上NGF对中枢神经元，特别是中枢胆碱能神经元有明显的营养作用，能影响这些神经元的存活及生长分化，尤其是在培养早期给予NGF可增加其营养作用[2-5]。如NGF可促进新生大鼠海马、皮质、小脑神经元的存活和轴突生长，刺激胶质细胞增生，促进新生大鼠隔区神经元的生长发育，使其细胞存活数显著增加，胞体迅速增大且生长得更加饱满，同时还能使神经元长出突起，并趋向共同培养的海马，即显著增加分布到海马组织的胆碱能纤维数量；同时还能提高乙酰胆碱酯酶（AChE）和胆碱乙酰转移酶（ChAT）的活性。体外实验还证实，NGF可促进神经细胞的分化、成熟，对轴索切断后神经细胞的死亡有明显的预防作用，且能促进损伤的轴索发生再生；另外，NGF还能通过诱发过氧化酶和谷胱甘肽转移酶的活性，调节神经细胞内氧化－抗氧化的平衡，保护神经元在老化期免受过氧化氢的损害。
