2.2 亲和吸附剂的制备及预处理
采用醋酸乙烯脂为单体,三烯丙基异氰尿酸脂为交联剂,在制孔剂存在下进行悬浮聚合,制得乳白色的大孔VT共聚物作为载体,经化学修饰,固载不同的氨基酸配体,制得AA系列吸附剂。
将AA系列亲和吸附剂用无水乙醇充分溶涨,尔后,用生理盐水洗涤,晾干,真空干燥待用。
2.3 血清CIC的测定
CIC的测定采用C1q-ELISA法测定,试剂盒由天津血液研究所提供。通过对30例健康人血中的CIC进行测定,其平均值为(39.7+24.3) μg/ml,与试剂盒提供的正常对照值相吻和,用以作为人血清中CIC测定的正常对照。
2.4 静态吸附实验
在25 ml具塞三角瓶中,加入一定浓度的免疫复合物血清,投入定量的吸附剂,置于一定温度的恒温水槽中,振荡一定时间取样,测定吸附前、后血清中循环免疫复合物的浓度(concentration of CIC),按下式计算吸附率(adsorption efficiency, %)和吸附量(adsortpion capacity, μg/g干树脂)。

式中:C0和C分别为吸附前、后血中的CIC的浓度;M为树脂的干重(g);V为血清体积(ml)。
2.5 动态吸附实验
在自制的聚四氟乙烯灌流器中,装入7 g吸附剂,该吸附剂经75%乙醇充分溶涨后用生理盐水冲洗干净,在37 ℃下,一定初始浓度的免疫复合物血清由恒流泵连接流入灌流器,其装置见图1。一定时间取样,测定吸附前、后血中免疫复合物的浓度,计算吸附率和吸附量。

图1 动态吸附实验装置
Fig 1 Apparatus for circulating adsorption
1.Cycle Immune Complex, CIC; 2.Column filled with adsorbent; 3.Pump
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