Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,体重(220±20) g。去甲肾上腺素(NE)和甲烯兰(MB)为Marck公司产品,普萘洛尔由Sigma公司生产,消炎痛购自黄河制药厂。
2.2 方法
大鼠断头处死后,立即开胸取出胸主动脉,在生理盐水中漂洗,清除动脉周围的脂肪及结缔组织,将动脉切割成2~3 mm的动脉环。然后将动脉环悬挂在充满生理盐水、体积为30 ml的浴槽中,并持续不断通以95%O2+5%CO2的混合气体。动脉环一端固定,另一端用细线与日产TB-611T肌肉张力传感器相连。肌肉张力传感器最终与Topcon286微机连接。实验中,微机每隔2 s时间,自动采集张力(F)与时间(t)一一对应的数据,在显示器上直接显示F-t曲线,并可将实验结果打印出来。
实验中先保持浴槽中液温为(33.0±0.5) ℃,动脉环悬挂于浴槽中后,立即加2.5 g的前负荷,并预调试5次。加入甲烯兰(10 μmol/L)、消炎痛(10 μmol/L)和普萘洛尔(3 μmol/L),平衡90 min后,将NE(10 μmol/L)注入浴槽中,同时微机开始采集数据。在测得33.0 ℃下的F-t曲线后,将槽中液温调升到并保持在(36.5±0.5) ℃。同时用生理盐水多次冲洗样本,然后加入上述剂量的甲烯兰、消炎痛和普萘洛尔,平衡30~60 min,直至样本张力回到对照水平,再注入NE(10 μmol/L),测得36.5 ℃下的F-t曲线。用上述同样方法测得样本在(39.5±0.5) ℃下的F-t曲线。实验中12个样本,在三种温度下,各测得三组数据。
3 实验结果
3.1 不同温度时,NE引起的大鼠主动脉张力F与时间t的关系
33.0 ℃组(Ⅰ)、36.5 ℃组(Ⅱ)、39.5 ℃组(Ⅲ)的F-t关系,均可用双曲线函数关系式(1)进行曲线拟合。图1是各组单根拟合曲线,有良好的拟合性。
F=X1-X1X2/t t>0 (1)