2.2 细胞培养及细胞悬液制备
细胞采用本研究室已经建立的THETCs，这种细胞是采用带有潮霉素(Hygromycin B)筛选标记的SV40温度依赖性质粒ptsA58H，经电穿孔法将其导入肌腱细胞并进行潮霉素B筛选，获得阳性克隆后进行扩增得到。复苏冷冻保存的第41～49代THETCs，用含10%小牛血清(Gibco Co.)的F-12培养基(Sigma Co.)加入青霉素100 u/ml，链霉素100 μg/ml，制成pH值为7.2的完全培养液，在37℃、5%CO2条件下培养。待细胞长成单层后，用0.25%胰蛋白酶液消化，使细胞悬浮分布均匀，按1∶2分瓶传代培养。取对数生长期的细胞(一般4～6 d)，消化离心，用不含小牛血清的F-12培养基制成1×104/ml细胞悬液，作为接种细胞待用。
2.3 聚合物薄膜的制备及其膜厚测量
分别将PLA和PLGA85/15各0.25 g溶于8 ml丙酮制成聚合物溶液。将载玻片(长76.2 mm，宽25.4 mm，厚1.1 mm)浸酸，洗净，浸于75%乙醇中消毒备用。在载玻片上制作直径约25 mm的小腔室(用20 ml一次性使用注射器外筒割制)。在离心机转头顶部放置小腔室，开动离心机(300 rpm)，在小腔室中心滴入0.3 ml聚合物溶液。溶液因离心作用而在小腔室底部载玻片上均匀铺展，形成聚合物薄膜。待有机溶剂充分挥发后，在紫外线下照射灭菌备用。用分辨率为1 μm的电感测微仪，机座用比长仪作运动导轨，对制作的聚合物薄膜进行膜厚测量。
2.4 细胞与聚合物薄膜粘附力学测量方法
图1 实验过程与装置
Fig 1 Schematic diagram of the in vitro experimental process
3 结 果
(1)聚合物薄膜厚度的测定结果显示，PLA膜和PLGA85/15膜的平均厚度分别为18.6 μm和17.4 μm，PLA膜厚最大值和最小值分别为24 μm和9 μm，PLGA85/15膜厚度最大值和最小值分别为29 μm和6 μm。按本文方法获得的聚合物薄膜均匀度较好，在倒置显微镜下具有良好的透光性，便于采用微管实验系统测定细胞与薄膜的粘附特性，同时保证细胞是与材料作用，而不是与其衬底玻璃作用；
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