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眼组织的透射电镜制样方法

  来源:120online      日期:2007-05-09
生物医学工程学杂志1999年第2期第16卷论著作者:杨 果 唐小佳 干德全单位:华西医科大学电子显微镜室,成都 610041关键词:眼组织;透射电子显微镜;电镜样品制备...



图1 透射电镜下示视网膜色素上皮细胞,细胞中线粒体(Mi)、内质网(ER)、细胞核(N)及色素颗粒(↑)等细胞器清晰可见。EM×8000

  Fig 1 Retinal pigmented epithelial cell,The mitochondria (Mi),endoplasmic reticulum (ER),nucleus(N),melanosome(↑) and other organells in the cell are clearly shown.EM×8000



图2 透射电镜下示角膜上皮细胞,细胞中可见细胞核(N)、内质网(ER)、线粒体(Mi)及微丝(MF)等细胞器,细胞间可见桥粒(De)。EM×12,000

  Fig 2 Corneal epithelium,There are distinet nucleus(N),endoplasmic reticulum(ER),mitochondria(Mi),microfilament(MF),intercellular desmosome(De) and other organells.Em×12,000

  3.2 讨论

  取材与预固定是眼组织透射电镜制样的关键,我们采用的沿赤道部位打孔的方法,可使内腔的压力降低,可以使预固定液充满眼球内腔,使内层组织固定充分,又可防止视网膜组织的卷曲或脱落。取材时不应将视神经保留,这样对二次取材确定组织的方位有所帮助。操作时应注意取材时应尽快将其浸入固定液,以防止出现细胞自溶现象,整个操作应动作轻,切忌损伤视网膜。对含有大量纤维的角膜可采取3%EDTA-Na2软化,对切片质量及组织反差都有所提高。固定液应采用4%多聚甲醛—2.5%戊二醛混合固定液,该固定液的穿透力较单纯戊二醛固定液强,特别对有致密的结缔组织固定较好。脱水应根据不同的组织而定时间,如视网膜组织脱水时间应相应缩短,以防止过度脱水,组织扭曲变形变脆,如角膜组织含有大量纤维组织,其脱水时间应适当延长,以保证脱水充分。包埋液浸透应适当延长浸透时间,勤搅动,用以保证浸透充分。

  参考文献

  1 罗清礼.视网膜色素变性的色素上皮细胞光镜和电镜观察.眼底病,1991;7∶150

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