2.2 实验内容
(1)血液粘度、粘弹性;(2)红细胞脆性、聚集性、变形性;(3)血小板聚集性;(4)骨压缩极限强度、压缩弹性模量;(5)骨弯曲极限强度等。
2.3 方法
将兔放入微波辐照腔内,调节微波的输出功率和时间,开启电源,对辐照组大白兔进行全身辐照,辐照距离10~20 cm,辐照时间6~15 min,微波发射强度51.3 W。辐照完毕由兔的颈静脉抽取血液9 ml,其中4 ml血液用3.8%枸橼酸钠抗凝,比例为9∶1,供血小板聚集测试用:4 ml血液用EDTA抗凝,供血液粘度和粘弹性测试用,另外1 ml用肝素抗凝,供红细胞脆性实验用。对照组的实验条件除微波辐射装置不输出微波功率外其它与实验组相同。各项流变学测试均在4 h之内完成。
血液粘度和粘弹性测量:将全血和离心分离后的血浆在37 ℃的温浴槽内预热15 min,然后抽取1 ml注入Low Shear 30流变仪中分别测量粘度和粘弹性,并按照Dintenfass的方法计算出红细胞聚集指数A.I.和变形指数Tk[11]。
血小板聚集功能测定:在100 g条件下离心血液15 min,取上层富含血小板血浆(PRP)待测,剩余血液再在2000 g条件下离心15 min,取上清液(PPP)对血液凝集仪进行标定,然后放入PRP,加入不同浓度(分别为2μM和6μM)的二磷酸腺苷(ADP),测量5 min内血小板的聚集过程,实验温度为37 ℃。
红细胞脆性实验按文献[7]的方法进行,通过分光光度计测定不同低渗盐水中游离血红蛋白量,用溶血率50%的氯化钠浓度表示脆性大小。
骨试件制备:将兔处死,取其前肢和后肢的肱骨、尺骨、桡骨、股骨和胫骨等,剔除骨上的肌肉,放入生理盐水中保存备用。
骨压缩测量:将尺骨、桡骨的骨干截为长4 mm的试件,胫骨骨干截为长8 mm的试件, 将试件安装在实验台的夹具上,两端施加压缩载荷P,测量P与压缩变形Δλ的变化过程,骨刚好压断裂时的载荷为最大极限载荷Pmax,最大变形为Δλmax。
骨变曲测量:将骨的两端固定于实验台的夹具上(L=20 mm),在其中部施加一横向载荷N,测量载荷N与桡度Δl的变化过程,当骨刚好变曲断裂时的载荷为最大极限载荷Nmax,最大桡度为Δlmax。
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