Key words Collagen spong Wound dressing
胶原在创伤修复中的良好作用越来越受到人们的重视,近20年以胶原或胶原为内层的创伤修复材料研究十分广泛也比较深入[1~6]。本文就牛腱胶原海绵以及牛腱胶原膜为内层,聚氨酯膜等材料为外层的几种创伤修复材料研制的方法介绍如下。
1 材料和方法
1.1 胶原溶液的制备
1.1.1 酸处理 新鲜成年牛腱,水洗,去除肌肉、肌膜及筋膜,凉干后贮存在-60 ℃左右的低温冰箱内备用。酸处理前,从冰箱内取出牛腱立即切成0.5 mm左右的薄片(越薄越好)并称重。腱片放入0.05 M乙酸中(pH3.2),使最终浓度为1.5%~2.5%(W/V)胶原-乙酸溶液,置4 ℃冰箱48~72 h,在此期间每天振摇2~3次,数小时后腱片便开始膨胀,直至膨胀成“棉絮状”为止。将膨胀后的胶原倒入组织捣碎机中(1500 r/min)开30 s停30 s,重复3~4次,即成为均匀的胶原溶液。
1.1.2 过滤脱泡 在捣碎后,用80~100#尼龙网过滤除去胶原溶液中的残渣。在捣碎和过滤胶原溶液时空气混入形成气泡,用真空减压脱泡。
1.1.3 加硫酸软骨素 将硫酸软骨素(GAG,成都制药三厂)溶于0.05 M乙酸内,为胶原总量的8%,滴液速度为15~30 滴/min,并不断的搅拌(1000 r/min)。
1.2 胶原海绵的制作
1.2.1 模具 (1)玻璃板长25 cm,宽20 cm,厚0.3~0.5 cm,两侧或四周加4~8层医用胶布或1 cm高的玻璃边框,涂少许硅油。(2)不锈钢盘30 cm×23 cm×1 cm。
1.2.2 预冻样品 (1)方法一,胶原液倒入模具内,擀平,放入-30 ℃左右的冰箱内预冻4 h以上。(2)方法二,将胶原液倒入特制的有机玻璃刮槽内,刮槽放在预冷玻璃模板(-30~-70 ℃)两侧的边框上,打开刮槽底部的滑板,将漏出的胶原液快速刮在玻璃膜板上,胶原液便平整地冻结在模板上。随后转入-30 ℃的低温冰箱,冷冻4 h以上或过夜。
1.2.3 真空干燥 将预冻后的胶原玻璃板快速转入冷冻干燥机内(FD-1、FD-2),真空冷冻干燥12~24 h,待样品温度回升到室温,再逐步加热至105 ℃,恒温24 h即成为胶原海绵。
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