DNA含量与滑膜肉瘤预后关系的研究

　　1.2滑膜肉瘤流式细胞分析及方法

　　1.2.1样品来源确含肿瘤组织的石蜡包埋的组织块在切片机上切取35μm厚组织片7片，经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，胃蛋白酶消化，再以300目尼龙筛网滤去未消化的组织碎片，用75％的乙醇固定制备好的单细胞，4℃保存，备检。

　　1.2.2制备好的单细胞悬液涂片，HE染色，显微镜下检查肿瘤消化情况，了解单细胞悬液的产量。1.2.3应用溴化乙啶一步插入法进行染色，检测前弃去待测样品中的乙醇将细胞调整至1×104个/ml，在其内加入5％的鸡红细胞作对照与标本同步染色。

　　1.2.4用美国产FACS－420型流式细胞仪检测样品，波长488nm，功率为300mW的氩离子为激发光源，变异系数稳定在5％以内，每例标本测定1.5万～2.5万个细胞，平均为2万个。

　　1.3结果判定

　　1.3.1DNA指数（DNAIndex）表示DNA倍体水平DI=测定细胞（G₀/G₁峰均道值）/内标细胞（G₀/G₁峰均道值）×2.85

　　本实验内标细胞为鸡红细胞，测定二倍体的鸡红细胞DNA含量为正常人淋巴细胞含量的35％，故乘常数2.85。依据DI值判定DNA倍体，本组资料以DI=0.9～1.10为二倍体及近二倍体，其它为异倍体。

　　1.3.2细胞周期细胞周期由计算机确定G₀/G₁期、S期、M/G₂期三期细胞的道数范围后，将落在各自道次上的细胞数叠加总合而得。增殖细胞指数PI=[(S＋M/G₂)/(G₀/G₁＋M/G₂＋S)]×100％。

　　1.4统计学方法

　　所得数据均值比较用t检验，百分率比较用χ²检验，以P＜0.05为显著水平。

　　2　结果

　　2.1滑膜肉瘤DNA含量

表1　单相型、双相型滑膜肉瘤的DI期、S期、PI比较