舌癌及癌前病变ras癌基因产物P21和DNA倍体的研究

　 来源：120online    　 日期：2007-05-07

　　近年的研究发现,人类肿瘤的发生、发展与癌基因的激活有关。ras基因是人体一个重要的原癌基因,当该基因被激活时,其效应分子的蛋白产物P²¹对人体正常细胞的转化及肿瘤的发生起着重要作用。有关ras基因产物P²¹在口腔恶性肿瘤的表达研究已有一些报道^〔1〕,但针对不同发生部位研究P²¹表达及DNA含量与临床的关系报道不多。舌癌是常见的口腔癌,因舌体具有丰富的淋巴管和血液循环,加以舌的机械运动频繁常引起早期淋巴结转移。为进一步探讨舌癌的生物学行为与组织发生、临床特点的关系,本研究应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术,对舌癌和口腔粘膜癌前病变ras P²¹表达量和DNA含量进行了定量检测,现报道如下。

材 料 与 方 法

　　①标本来源为存档的石蜡包埋组织块中的舌鳞癌37例。其中分化Ⅰ级20例,Ⅱ级11例,Ⅲ级

　　6例(根据1971年WHO国际肿瘤分类)。口腔粘膜癌前病变组织10例,取正常口腔粘膜组织3例作为对照。②将石蜡包埋组织切40 μm厚的组织片经二甲苯脱蜡,梯度酒精水化后用搓网方法制备单细胞悬液并采用间接免疫荧光染色方法进行ras P²¹单克隆抗体标记^〔2〕。采用溴化乙啶荧光染液对细胞DNA进行染色。③应用美国BD公司生产的FACS 420型流式细胞仪,分别进行单参数检测、测量数据及资料处理。DNA含量以DNA指数(DI)表示相对DNA含量,依据DI值判定DNA倍体,DI=1.0±2 CV为二倍体,DI≠1.0±2 CV为异倍体。应用计算机细胞周期分析软件计算出各时相百分比,以增殖指数PI表示增殖活性。按照Morkve^〔3〕提出的荧光指数(FI)分析方法表示P²¹表达的相对含量。FI＞1.0表示P²¹表达阳性,FI=1.0或＜1.0为阴性。所有资料的统计学方法采用t检验。

结 果

　　一、舌癌及口腔粘膜癌前病变ras P²¹表达结果

　　按照荧光指数判定,3例正常口腔粘膜组织P²¹表达均为阴性。舌癌及癌前病变组织P²¹表达的荧光指数见表1。

表1 舌癌和癌前病变P²¹表达的荧光指数

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