材料和方法
一、材料
1．实验动物：叙利亚金地鼠 195只，清洁级，周龄 4～8周，体重80～100 g，封闭群。上海西普尔BK实验动物公司提供。
2.实验致癌剂：二甲基苯并蒽(dimethylbenzanthracene, DMBA) 1 g，室温下加入到200 ml丙酮液中，配置成0.5% 的DMBA液。
3. PCR仪：型号GENIUS。
4. PCR-SSCP有关引物和试剂：含61位密码子特异反应的引物序列：引物1为5＇ACGGAATATAAGCTGGTGG3＇，引物2为 5＇CGGCGGCAGGTCCACGGTC3＇，蛋白酶K、裂解液、PCR试剂盒由上海第二医科大学提供。自配试剂：变性液(95%甲酰胺、2 mmol/L EDTA Na2, 0.05% 溴酚蓝、0.05% 二甲苯青)；固定液(10%乙醇、0.5% 冰醋酸)；显色液(0.4% 甲醛、1.5%氢氧化钠)。
5.绞股蓝：云南产绞股蓝干全草。由国家医药局上海医药工业研究院中药研究室参照竹本常松法［4］提取GP总甙（简称GP-A）、GP甙元(简称GP-B)和含C20位游离羟基的GP(简称GP-C)。
二、方法
1．实验动物分组及处理：①空白对照组(2只)：空气流通、室温23～26℃、相对湿度75%～80%环境下分笼养，每笼≤10只。食用金地鼠全价营养颗粒饲料和1%维生素C液。双侧颊囊粘膜涂布生理盐水，于实验结束时处死。Salley［5］在1954年建立此模型时已证实丙酮在金地鼠颊囊癌前病变的诱导实验中不具致癌作用，故本实验未设丙酮对照组。②OLK模型组(48只)：相同条件下饲养，双颊涂布DMBA诱导致癌，分别在涂布满4、5、6、7、8周时分批处死9～10只。③GP处理组（145只）：其中 gP-A 48只，GP-B 50只，GP-C 47只。相同条件下饲养，并按每天3.5 mg/只剂量灌胃喂服GP，12周后开始DMBA涂布双颊，分别在涂布DMBA满4、5、6、7、8周后各处理组分批处死9～10只。
2. OLK模型制作：参照Selly法［5］。乙醚麻醉金地鼠后，大直镊撑开双侧颊囊口，以1号油画笔蘸取少量DMBA液，以颊囊前静脉为中心作圆周式涂布10次，禁食禁水2 h，每周重复3次。
3.标本处理：处死后，取两侧颊囊组织，每只金地鼠可制标本2例。将新鲜标本用甲醛固定，石蜡包埋，常规切片。分别作PCR-SSCP检测及HE染色，常规镜检。
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