针对以上问题，本研究对糖漱口前后同一个体牙根面和牙冠面菌斑液的pH、游离钙和总蛋白水平的动态变化进行了测定，并分析这些变化与根龋易感性的关系，以探索根龋发生发展的化学动力。
材料和方法
1.受试对象：随机选择门诊患者47例，要求上颌后牙牙根面暴露。分为两组：无根龋组(无根龋也无因根龋充填者)22例和有根龋组(有根龋或有因根龋充填者)25例。
2.漱糖实验：要求所有受试者自受试前24 h开始不进行任何口腔保健，并在进食后1 h以上采集菌斑。第1次，单纯采集菌斑，测定基线成分；第2次，受试者以10%蔗糖溶液漱口1 min，3 min后取菌斑。
3.菌斑采集和菌斑液的分离：根部和冠部的菌斑标本均单独采集、保存和测定。隔离唾液，以挖匙刮取双侧上双尖牙和磨牙的健康根面或冠面的龈上菌斑，置于尖端事先已熔融封闭的微量加样器超微头中，保存于冰壶。低温离心(4℃ 15 000 g，15 min)得上清液即为菌斑液。实验一，离心后立即测定pH值和游离钙浓度(无根龋组10例，有根龋组17例)。实验二，先取出1 μl菌斑液，用1 ml 0.9%生理盐水稀释，冰冻，待后测量总蛋白含量；剩余的菌斑液立即测定游离钙浓度(无根龋组12例，有根龋组8例)。
4.游离钙含量的测定：仪器为微量钙离子选择性微电极(MI-600，Microelectrodes, Inc, Londondery, NH)，其敏感膜为聚氯乙烯膜；毛细管微参比电极(MERE1，WPI，Inc)；Orion 901/离子分析仪(Orion Research, USA)。样本的游离钙浓度用标准曲线法测得。
5.pH值的测定：仪器为氢离子敏场效应管(H+-ISFET)，一种应用集成电路装配技术装配而成的固体传感器，面积约2 mm2的敏感膜为经过活化处理的Si3N4膜；Ag-AgCl-饱和KCl凝胶玻璃管参比电极(尖端直径约1 mm)；pH/mV测试仪(JEAS-92型)(以上均为中国科学院电子学研究所研制)。计算方法同游离钙的测定。
6.总蛋白的测定：根据双金鸡纳酸(bicinchoninic acid, BCA)的双缩脲反应采用分光光度法测定。
结果
