材料与方法
1． 材料：胚胎14及21 d的Wistar 大鼠各3只。
2． 用乙醚麻醉法处死动物，沿矢状方向从中线将头颅剖开，取牙胚（颌骨）、颅骨组织。将所取组织置于3％戊二醛中固定，4℃过夜，0.2 mol/L PBS（pH 7.2）漂洗，1％锇酸后固定2 h（4 ℃），梯度丙酮常规脱水，环氧树脂618浸透、包埋。经Diamond ultramicrotome knife,Drukker Co 超薄切片，Hitachi 600 透射电镜观察。
结果
一、骨细胞、成牙本质细胞的分化及基质形成
在14及21 d胚龄Wistar 大鼠颅、颌骨及牙胚处，可观察到不同分化阶段的成骨细胞和成牙本质细胞。在分泌型成骨细胞阶段，细胞表现出很强的合成能力和活跃的分泌功能。在细胞周围有大量新合成的胶原原纤维，排列较稀疏、无方向性。原纤维间无定型基质丰富，离胞体稍远部位的胶原原纤维的排列较密集、规则、趋于束状，周期横纹清晰。
部分成牙本质细胞亦表现为十分活跃的生物合成状态，其顶端有较为丰富的新生胶原原纤维及无定型基质。原纤维排列亦无规则且疏松。有少量周期横纹明显的粗大原纤维，原纤维由少到多、由疏松到致密、最后规则地交织在一起，而且越远离细胞越趋于成熟。
二、MVs的形成及变化
随着骨胶原基质的逐渐成熟，可见分泌型成骨细胞不断从细胞表面和突起边缘释放MVs进入基质（图1）,MVs呈圆形、直径约100～300 nm、电子密度不一，越远离细胞体直径越大，电子密度越高。HAP首先出现在较小的MVs内，呈针状、细丝状或颗粒状，较大的MVs周缘可见放射状排列的HAP结晶。当MVs体积及内部HAP数量增加到一定程度时，MVs膜逐渐消失，HAP晶核完全暴露于胶原基质中并逐渐向周围扩散，沉积于胶原基质内（图2）。在成熟胶原纤维表面可见平行排列的MVs，部分原纤维表面可见与其长轴平行的HAP晶体，这些晶体与MVs分泌的晶体有明显移形的迹象（图3）。
在牙胚较成熟的牙本质内也可观察到大量MVs。MVs在基质中亦有不断增大、密度增高等逐渐成熟的过程，可见HAP在MVs膜或内部出现、数量增多及最终进入基质的过程。此外，在一些矿化较密集的区域，亦可见散在的MVs的圆形轮廓，周缘呈羽绒状，而且与胶原基质中的HAP有明显移形的迹象（图4）。
上一页 1 [2] 3 4 下一页
