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重要条件致病真菌感染组织免疫组化研究

  来源:120online      日期:2007-05-07
中华皮肤科杂志2000年第5期第33卷论著作者:狄梅 涂平 李若瑜 王端礼单位:涂平 李若瑜 王端礼(100034北京大学第一医院皮肤科);狄梅(研修生,现在北京安贞医院皮肤科100029)关键词:念珠菌属;隐球菌属;曲霉菌属;免疫组织化学...

  2.免疫组化染色证实7份为阳性,菌丝被染成棕褐色,细胞壁染色明显,进一步证实为曲霉感染。

  3.对照实验表明鼠抗曲霉单克隆抗体与白念珠菌、新生隐球菌无交叉反应。

  讨论

  近年来,条件致病真菌引起的真菌病在增加,条件致病真菌引起的深部真菌病往往被误诊为肿瘤和其它感染,本实验回顾性研究的28例患者除5例伴有皮肤损害的真菌感染外,其余均被误诊,经组织病理学证实为真菌感染。目前组织病理学诊断真菌病还停留在一个较低的水平,5例深部念珠菌感染患者均被诊断为霉菌感染,而12例丝状真菌感染患者也只诊断到霉菌感染水平,只有隐球菌感染获得了较明确的诊断。

  很多真菌在组织中形态相似,且真菌形态受多种因素影响,给形态学确定真菌种类造成困难。免疫组化根据真菌抗原性的不同,可在组织切片中将真菌分类。本实验所用方法是LSAB法,即标记链霉亲和素法。白念珠菌是念珠菌感染中的主要致病菌,本实验所用兔抗白念珠菌多克隆抗体能够特异性检出白念珠菌,此抗体虽然与隐球菌和部分曲霉有弱的交叉反应,但是结合PAS染色的形态改变,如隐球菌主要以孢子存在,极少形成菌丝,而曲霉多以菌丝存在,菌丝粗大,有叉状分支,所以依然可以诊断白念珠菌感染。此抗体和PAS染色检出的敏感性差异无显著性[2,3]。白念珠菌与多种人体组织有交叉免疫,需做多种对照慎重作出诊断。兔抗新生隐球菌多克隆抗体能够特异性检出组织中的新生隐球菌,此抗体与白念珠菌和曲霉均不发生交叉反应,特异性好[4,5]。鼠抗曲霉单克隆抗体可以检出组织中烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉。烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉是曲霉病主要致病菌,阳性结果可以作出曲霉感染的诊断[6-8]。在念珠菌和隐球菌感染体的免疫组化染色中,均看到一种现象,即肉芽肿病变中部分组织细胞和多核巨细胞胞浆内有阳性染色。而非真菌肉芽肿损害中无阳性结果,这与数位国外学者得出的结果一致[5],提示真菌肉芽肿这种阳性染色模式具有一定特异性。可能与真菌抗原在体内被组织细胞呈递处理有关。肉芽肿中阳性染色是否可以做为特异性染色成为诊断依据还需进一步研究探索。免疫组化为组织中确定真菌和鉴定真菌类别提供了新的可靠方法,有助于条件致病真菌感染的诊断。随着特异性抗体的增多和交叉反应的减少,真菌感染的免疫组化将有较好的应用前景。

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