（三）方法：
1.甲组织切片的制作：将取下的甲组织修成3mm×3mm×3mm大小，置3.33mol/L(10％)福尔马林液固定12～24h，经3.17mol/L(20％)硝酸脱钙3d，饱和碳酸锂过夜，水洗5～6h，常规脱水包埋，制成5μm厚切片，进行组化染色。
2.溶甲涂片的制作：将靶甲先以无菌蒸馏水及16.29mol/L(75％)酒精各刷洗2次，无菌取下病甲组织，置5.0mol/L(20％)NaOH溶液37℃软化2h，无菌蒸馏水水洗，离心（3000r/min）5min，3次,倾去上清液，取管底沉淀物涂片，烤干，待染色。
3.凝集素染色：按本教研室常规ABC方法进行12种凝集素染色，每种凝集素及空白对照试验均重复1次，并以正常人皮肤做阳性对照证明本方法的可重复性。在光学显微镜下观察结果。与正常空白对照相比呈深棕色为强阳性（
），呈棕黄色为阳性（＋），无明显差异为阴性（－）。
结果
44例甲组织切片和28例溶甲涂片中真菌的凝集素结合形式见表1。同一种真菌在组织内与溶甲涂片中凝集素结合形式完全相同。红色毛癣菌、铁锈色小孢子菌、絮状表皮癣菌、念珠菌属、曲霉属、青霉属及镰刀菌属的7个种属ConA、PSA均呈阳性反应，其余10种凝集素的结合形式则各不相同，显示这些真菌在甲组织切片和溶甲涂片中与凝集素结合形式具有属间特点及部分种间特点（见图1～4）。10例分离出混合种属者，其凝集素结合形式呈现叠加的特点。
讨论
结果表明，每一菌种甲真菌病组织切片和溶甲涂片的凝集素结合形式均与培养的相应菌种相同。只有铁锈色小孢子菌PSA的结合特点不同，但不影响其种、属的特点。可见真菌细胞表面的结合糖作为凝集素受体的结构颇为稳定，经过处理后仍保持其属乃至种的特点。据此推测，对临床病甲标本进行凝集素染色，将其结合形式与培养的标准（保存）菌种的结合形式比较，可能在直接检出甲内真菌成分而确认其病原性的同时，鉴定其菌属乃至部分菌种。
辽宁省自然科学基金和中华医学会皮肤科分会资助课题
