程[3-12]。实际上甲真菌病病原菌的不同,可能与下列情况有关。一旦病原菌侵入甲板,在某种程度上,逃避了自然的抗菌防御和免疫监视。这种情况与侵入皮肤角质层不同,在皮肤中,它受到宿主的抗菌蛋白和针对消灭真菌的局部炎症细胞的影响。
真菌培养、组织病理、免疫组化和流式细胞计数共同用来鉴定甲真菌病的不同菌种[4-6,13]。在欧洲,甲真菌病的病原菌皮肤癣菌约为75%,酵母菌和其他霉菌各为10%。此外,两种或两种以上的真菌混合感染,仅占甲真菌病的5%。甲真菌病的不同病原菌,对于治疗是一个极大的挑战,选择广谱抗真菌药伊曲康唑是有吸引力的。而且,此药能迅速穿入甲板并能长期存在于甲内[14]。
一、体外药敏试验
体外试验可首先决定抗真菌药的抗菌谱[15]。文献中有各种各样的方法处理药物在一些培养基内扩散能力有限的技术困难。如不能正确说明,对资料和解释可产生偏见。
目前的方法是测定能抑制真菌生长的药物最小抑菌浓度(MIC),此外也测定最小杀菌浓度(MFC)的能力[16]。对某一真菌的MFC和MIC非常接近时,该药被称为对该菌的杀菌药,当两个值明显不同时,则使用抑菌这个词。
二、离体角质真菌测定生物分析法
用氰基丙烯酸酯皮肤表面剥除法(cyanoacrylateskinsurfacestripping,CSSS)从正常皮肤上取下皮肤角质层[17],用这种标本作为基质,在体外将选择的真菌病原菌放在上面生长。简言之,从沙堡培养基的初代培养物收集分生孢子,接种于CSSS中央,置于有湿环境的温箱内,培养10d。此时,真菌逐渐生长,并在角质层内形成菌丝体。
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