【Key words】 Rheumatoid arthritis; Anti-type Ⅱ collagen antibody; Enzyme-linked immunosorbent assay; C-reactive protein
抗Ⅱ型胶原抗体(antibodies to type Ⅱ collagen)与类风湿关节炎(RA)病情活动性、严重性的关系目前仍有争论。本研究参照Fujii等[1]提出的实验条件检测179例RA患者、171例其他风湿病和118名正常人血清的抗Ⅱ型胶原抗体,探讨其在RA中的临床意义。结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 病人组:为1994年9月至1999年3月在汕头大学医学院第一附属医院风湿科住院、门诊、随访的RA患者,共179例,全部符合1987年美国风湿病协会(ARA)的RA分类标准[2]。其中男性53例,女性126例,年龄17~76岁,平均46.3岁。其中病程1年之内,X线未出现明显骨质破坏者(以下简称早期病例)30例。
1.1.2 对照组:共289例,分为两组:一组为同期在汕头大学医学院第一附属医院风湿科门诊或住院的非RA的其他风湿性疾病患者171例;另一组为正常对照组,共118名。
1.2 抗Ⅱ型胶原抗体的体测
参照Fujii等[1]的方法。
1.2.1 微量反应板的包被及封闭:正常羊血清于62 ℃加热20 min,加入固体Tris (0.05 mol/L)、NaCl (0.15 mol/L)和2 mol/L HCl,调pH值至8备用(BNGS)。天然Ⅱ型胶原在46 ℃水浴中加热20 min,即为变性胶原。
将天然Ⅱ型和变性Ⅱ型胶原分别溶解于0.05 mol/L的醋酸中,浓度为3 mg/ml。0.02 mol/L磷酸缓冲液(PB) pH 7.6稀释胶原溶液,使浓度为40 μg/ml,加入微量反应板孔,每孔100 μl,保鲜膜覆盖,4 ℃过夜。
在与待检血清标本进行温育之前,包被好的微量反应板用含0.05%吐温-20的生理盐水溶液洗涤3次,然后每孔加入100 μl BNGS,室温(24~28 ℃)下封闭30 min,洗涤液洗涤3次。
1.2.3 结果判断:以正常血清的平均A值加3个标准差作为正常值上限,待检血清A值超过者即被认为是阳性。
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