3、ANCA检测方法
常用的ANCA检测方法有间接免疫荧光法（ⅡF），酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫印迹法，免疫沉淀法和放免法等。经典方法为ⅡF，该法有较强敏感性，是区分c-ANCA和p-ANCA的基础。ⅡF法制备中性粒细胞底物片时，可由于固定方法的差异而影响实验结果，用甲醛固定时，ANCA只表现c-ANCA，而无p-ANCA。Falk证明用此固定方法时由于细胞浆中ANCA抗原如MPO不能从嗜天青颗粒中释放，表现为胞浆内均一的荧光染色即c-ANCA。用无水乙醇固定时，MPO等抗原物质可以从嗜天青颗粒中释放出来，由于电荷作用吸附在细胞核周围形成p-ANCA，故ANCA的荧光染色模型是人工形成的。ⅡF检测ANCA时，常因抗核抗体（ANA）存在，而出现p-ANCA假阴性。Pauzner等采用二步法检测ANCA，即先用甲醛、丙酮固定的中性粒细胞检测，阳性血清稀释后再用乙醇固定的中性粒细胞测定，减少p-ANCA假阳性。
80年代后期开始应用ELISA，包括总抗原ELISA和抗原特异性ELISA（以MPO和PR3-ELISA最为重要），抗原特异性ELISA简便易行，但部分抗原（尤其是PR3）纯化过程复杂、价格昂贵，较难开展。总抗原ELISA适用于大批量检测。由于中性粒细胞胞浆中各种蛋白质含量不一，与ELISA的结合能力不同，实际工作不能测到所有靶抗原。
有学者对598份待检血清分别用上述三种方法检测ANCA的结果显示，ⅡF法ANCA阳性率5.85%(35/598)，同时检测ANA阳性39份，总抗原ELISA阳性率4.18%（25/598），抗原特异性ELISA总阳性率为4.35%（26/598），其中MPO-ELISA阳性率3.18%（19/598），PR3-ELISA阳性率1.17%（7/598），结果显示ⅡF法检测ANCA敏感性好，但ANA滴度较高时，结果较难判断。临床上单独使用一种方法，尚不完善，应提倡ⅡF法联合后两方法之一，提高检出率降低假阳性。
4、展望
ANCA作为系统性血管炎的敏感标记抗体，提高了人们对原发性血管炎的认识，产生了ANCA相关系统性血管炎的概念在此基础上，产生了抗PR3系统性血管炎和抗MOP-系统性血管炎的分类。因此探讨不同ANCA亚型与各种临床疾病的关系，将对血管炎性疾病的诊断治疗及相关疾病的鉴别诊断有重要意义。许多实验室工作需要与临床相结合，以便更深入了解AASV的发病机制，对AASV的临床治疗给予指导。
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