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TaqMan聚合酶链反应技术检测结核分支杆菌DNA及其临床应用

  来源:120online      日期:2007-05-07
中华结核和呼吸感染2000年第5期第23卷论著作者:陈效友 高薇薇 张树才 王洪平 金玉生 张伟单位:陈效友 高薇薇 张树才(101149北京市结核病胸部肿瘤研究所);王洪平 金玉生 张伟(中国医学科学院肿瘤研究所)...

  关键词: 结核;分支杆菌,结核;聚合酶链反应

  【摘要】 目的 探讨TaqMan聚合酶链反应(TaqMan-PCR)技术在肺结核诊断中的价值。方法对168例活动性肺结核、57例肺癌患者的痰和外周血及34例健康对照外周血,同时应用TaqMan-PCR、PCR检测,并与痰涂片法、BACTEC法及改良罗氏培养法结果进行比较。结果 TaqMan-PCR检测痰和外周血总的阳性率分别为53.0%和61.3%,显著高于PCR、痰涂片法、BACTEC法及改良罗氏培养法(P<0.05)。TaqMan-PCR检测痰和外周血特异性分别为96.5%和94.7%,与PCR检测痰和外周血的特异性为93%相比,差异无显著性(P>0.05)。在105例痰涂片阴性及痰培养阴性肺结核患者中TaqMan-PCR检测外周血的阳性率达45.7%。结论 TaqMan-PCR具有较高的敏感性和特异性,对肺结核尤其痰涂片阴性及痰培养阴性肺结核的诊断有价值。

Detcetion of DNA extracted from Mycobacterium tuberculosis by TaqMan-PCR technique and its clinical application

CHEN Xiaoyou*, WANG Hongping, JIN Yusheng,et al.

  Beijing Tuberculosis & Thoracic Tumour Institute, Beijing 101149, China

  【Key words】 Tuberculosis; Mycobacterium tuberculosis; Polymerase chain reaction

  当今,结核病依然十分猖獗,全球约有1/3人口感染结核分支杆菌,每年有800~1 000万新发病例及300万人死于该病[1-3]。控制传染源和尽早发现新发病例显得尤为重要。目前,结核病的实验室诊断方法不外乎结核分支杆菌的痰涂片法和改良罗氏培养法,然而,涂片的阳性率低、培养费时已成人们的共识。1985年Mullis创建了聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)技术,1989年Hance等[4]首先将该技术应用于检测分支杆菌,1990年我国引进该项技术,从而开辟了以PCR为代表的分子生物学技术检测结核分支杆菌阶段。PCR技术灵敏度高,可检测1~100 fg纯化结核分支杆菌DNA(约相当于1~20个结核分支杆菌菌体的DNA量)[5]

  材料与方法

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