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基因治疗帕金森病大鼠脑内纹状体多巴胺含量的检测

  来源:120online      日期:2007-05-07
中华老年医学杂志1999年第3期第18卷基础研究作者:曲伸 何小龙 侍坚 由振东 王成海 路长林单位:200433上海市,第二军医大学基础医学部神经生物学教研室〔曲伸(现在200433上海市,第二军医大学附属长海医院内分泌科)、何小龙、侍坚、由振东、王成海、路长林〕...

  4.脑内纹状体多巴胺含量测定:每组12只帕金森大鼠模型用于纹状体多巴胺含量测定,分别在移植后第2周和第8周取6只大鼠断头取脑,立即置冰上分离纹状体,保存于-70℃冰箱内待测。测定时称重,加入高氯酸匀浆,离心取上清,过滤后行高效液相测定。采用美国Waters 公司460型高效液相色谱仪及481型电化学检测器,C18 色谱柱25 cm× 0.46 cm, 颗粒度5 μm。流动相:NaH2PO42H2O、辛烷磺酸钠、EDTA2Na、乙晴。0.2 μm纤维素脂膜过滤,85%磷酸调pH至3.5,流速1.0 ml/min,电化学检测器检测电压+0.65 V,参比电极Ag/AgCl, 灵敏度32 nf/mV,进样100 μl,标准品倍比稀释,作稀释曲线。

  三、 统计学处理

  数据以均数±标准误(±)表示,显著性检验采用小样本t检验和多样本均数方差分析。

  结  果

  一、大鼠细胞移植后双侧纹状体多巴胺含量

  见表1。在细胞移植后第2周和第8周对照组和移植组毁损侧纹状体多巴胺含量较之健侧均明显降低,差异均有极显著性;移植组毁损侧纹状体多巴胺含量较对照组毁损侧有明显增高,相差约3倍,两者差异有极显著性,表明基因工程细胞脑内移植使毁损侧纹状体多巴胺含量明显提高。

表1 细胞移植后各期各组双侧纹状体多巴胺含量(±,pg/mg)

  二、不同时程多巴胺含量百分比比较

  移植组毁损侧纹状体多巴胺含量百分比在移植后第2周和第8周仍维持在较高水平,分别为健侧同时程的51.0%和51.7%;而对照组毁损侧纹状体多巴胺含量百分比在各时程均明显降低,分别为健侧同时程的16.8%和17.8%,两组差异均有极显著性(均为P<0.01)。

  讨  论

  参考文献

  1 Ungerstedt U. Postsynaptic super sensitivity after 6-Hydroxydopamine induced degeneration of the nigro-striatal dopamine system. Acta Phys, 1971,367 Suppl:69-90.

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