3.脾淋巴细胞增殖实验:按文献〔4〕方法制备小鼠脾淋巴细胞悬液,用Con A刺激增殖后用MTT法测定。
4.IL-2活性测定:取脾细胞培养液上清,利用培养IL-2依赖细胞株CTLL-2进行检测,制备标准曲线计算样品IL-2活性。
5. 血细胞SOD活力测定〔5〕:采用邻苯三酚自氧化法,用标准品制备标准曲线,计算样品活力。
6.AGE的检测:参照文献〔6〕所述,用特异的AGE-ELISA法测定血清样品。用标准品制备标准曲线,计算样品AGE含量。给药所使用的AGE由0.78 mol/L L-赖氨酸与0.63 mol/L D-半乳糖在PBS中37℃温浴2个月制得,浓度为75.6 U/ml,检测方法同上。
结 果
D-半乳糖、L-葡萄糖、AGE等药物对小鼠血清AGE含量、学习记忆能力、免疫系统和SOD活性的影响见表1。由表1可见,正常老年小鼠及注射D-半乳糖、L-葡萄糖、AGE的青年小鼠血清AGE含量较高,自主活动减弱,在避暗试验中,潜伏期均较PBS组短,而错误次数差异无显著性。D-半乳糖、L-葡萄糖、AGE都可降低青年小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,减少IL-2的分泌,产生类似正常老年小鼠的免疫功能低下现象。正常老年小鼠血红细胞SOD活性较青年小鼠低,而D-半乳糖、L-葡萄糖、AGE组的SOD活性与正常老年鼠接近。AG可对抗D-半乳糖引起的自主活动减弱、潜伏期缩短、降低SOD活性效应和免疫系统拟衰老作用,同时对D-半乳糖引起的血清AGE水平增高有明显制作用。
表1 D-半乳糖、L-葡萄糖、AGE等药物对小鼠血清AGE含量、学习记忆能力、免疫系统和SOD活性的影响 (
±s)
| 组 别 | AGE含量(U/ml) | 动物行为学指标 | 免疫学指标 | 血红细胞 讨 论 本课题为国家自然科学基金资助项目(39770907)
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