二、动物模型制作
1.外固定器 自制Ilizarov环形外固定器。环间距2.5cm，上环上方留出5cm螺纹棒待延长。
2.手术方法 将动物仰卧位固定于操作台上，用质量分数为2.5%的硫喷妥钠0.4ml/kg静脉麻醉，于右小腿前内侧，胫骨结节下0.5cm处向下纵行切开1.5cm，纵行切开骨膜并环形剥离。骨膜下穿过线锯并由切口引出。将外固定器套入右小腿，上环距膝关节2cm。紧贴上、下环的上下面，分别垂直于骨面，交叉钻入2根直径1mm的克氏针，通过螺栓固定于环形器上。直视下截断胫骨，缝合切口。术后动物分笼饲养，自由活动，肌注水剂青霉素3d。
3.延长方法 术后第6d，拍右小腿X线片，测量胫骨长度。按每天1mm，分4次开始延长。每组经X线片证实达各自计划延长的幅度后停止延长。
三、取材与标本制作
1.取材 于各组延长期结束后，处死动物。切取胫骨平台及股骨髁，体积分数为10%福尔马林液固定72h。
2.石蜡切片与标本制作 于股骨内外髁与胫骨关节面接触部位及胫骨内外髁未被半月板覆盖的部位，矢状面切取厚3mm的骨软骨标本，常规脱钙，包埋，矢状面切成6μm厚的切片，分别行HE染色、沙黄O染色及Mallory染色。
四、组织学观察
切片于光镜下观察，参照Mankin的骨关节炎的病理表现及分级标准［4］，评价实验侧的病变程度。沙黄O染色选同一观测部位，即股骨髁最高点，胫骨平台中间部位。采用Leitz,MPV-COMBI显微分光光度镜，计算100μm×50μm方格内的平均吸收值，确定关节软骨不同区域的沙黄O染色深度。
结果
一、对照侧
关节软骨基本组成有基质和软骨细胞。HE染色见基质呈均质状，软骨细胞排列层次清楚。软骨表面光滑，全层未见血管分布。Mallory染色，胶原纤维呈束状从关节软骨最深层发出，在软骨细胞柱之间向关节表面垂直延伸，在接近表面处分成小束然后弯曲呈辐射状走行，形成平行于关节面的纤维网。沙黄O染色，软骨基质染成红色，各层染色均匀。
