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肾母细胞瘤裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性

  来源:120online      日期:2007-05-07
中华小儿外科杂志2000年第2期第21卷实验研究作者:毕允力 高解春 姚明单位:毕允力(200032 上海医科大学儿科医院外科)高解春(200032 上海医科大学儿科医院外科)姚明(上海肿瘤研究所)...

  结果

  1.裸鼠及移植瘤的生长特点 10个月中连续裸鼠皮下传4代,共移植裸鼠76只,移植1周内局部肿块逐渐消退,7周后肉眼见肿瘤逐渐增大。鼠间传代潜伏期为50d左右,第1代移植瘤6个, 成瘤率100%(6/6),第2代21个, 成瘤率42.9%(9/21),第3代9个, 成瘤率44.4%(4/9), 第4代40个, 成瘤率40%(15/40), 总成瘤率为43%。第2代长期饲养的4只荷瘤鼠平均生存中位数为223d,最长荷瘤时间为261d。

  2.移植瘤组织动力学 第2代4只荷瘤鼠连续观察12周,绘制生长曲线。曲线经潜伏期进入快速生长期后逐渐进入平台期。曲线与Gompentz函数符合。第2代荷瘤鼠肿瘤倍增时间见表1,随接种时间增加,倍增时间似有迅速增加趋势。

表1 第2代荷瘤鼠体积及倍增时间

  镜检可见移植瘤周围结缔组织边界清楚,未见明显癌组织侵入周围组织。心、肺、肝等重要脏器病理未见肿瘤转移灶。

  4.透射电镜检查 电镜下可见,肿瘤细胞极其丰富,细胞核密集、核大、不规则、核仁多、贴边、包浆少, 可见核糖体及粗面内质网。所检测的第2、第4代移植瘤均有上述表现。

  5.免疫组化 Vimentin在各代肿瘤细胞中均可见表达。而EMA这一上皮性标记在本肿瘤中均无阳性表现。与原肿瘤免疫组化结果一致。

  6.DNA图像分析 图像分析结果(表2)提示各代移植瘤DNA指数及其细胞时相分布基本一致,保持恶性肿瘤细胞的生长特征。

表2 各代移植瘤DNA指数与细胞时相分布

图1 各代肿瘤WT1电泳条带图

  讨论

  裸鼠移植瘤模型的出现大大提高了肿瘤异体移植成功率,简化了移植瘤制作过程。与体外细胞培养相比,移植瘤模型的建立和长期传代相对方便,不受成纤维细胞污染;更重要的是它保留了实体肿瘤生长的特点,如肿瘤的增生受宿主的营养情况和血供的影响;而且能够同时观察肿瘤和宿主的相互影响。目前裸鼠移植瘤模型已成为化疗药物筛选的主要工具[2]。更有大量的文献报道了移植瘤在肿瘤病理形态、生化指标、肿瘤生长、肿瘤转移等方面的研究应用。

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