建立人肿瘤裸鼠模型必须具备3点[3]:①移植瘤能在动物体内持续增殖和长期传代,②移植瘤的形态和功能与原人体肿瘤保持一致,③从遗传学角度证明移植瘤来源于人体而非受体动物。研究发现,第1代移植瘤可建立长期传代模型的概率约为1/3,而第3代的可能性增加到90%。移植瘤在免疫缺陷的宿主中可能诱发自发瘤,但其发生率极低,仅约1.7%,多见的是淋巴网织系统肿瘤和肺腺癌[4]。可通过组织病理和各种生物特性观察予以确定。
研究发现,不同肿瘤移植接种成功率不同,肾母细胞瘤接种成功率为33%左右[2]。接种成功率决定于每个肿瘤自身的特性、 肿瘤的类型、来源(原发肿瘤、复发肿瘤、转移瘤)、标本处理方法、组织分化, 以及裸鼠的周龄、营养状况、感染情况、接种部位都将影响接种结果。裸鼠前胸外侧壁较后侧肢体成功率高。裸鼠虽无T淋巴细胞,但仍有免疫球蛋白、自然杀伤细胞、吞噬细胞,随裸鼠成熟或在感染情况下,这类免疫功能将成熟或被激活,使接种成功率降低。有报道用免疫抑制剂Carragheenan抑制吞噬细胞功能或使用3周内的幼鼠可增加接种成功率。许多学者发现肿瘤的恶性程度与接种成功率有关,预后差的肿瘤、复发肿瘤及尸检标本接种成功率高,肿瘤病理分化程度差接种成功率高。
本课题接种的标本正是1例低分化间变型肾母细胞瘤,肿瘤为4期,临床见肿瘤已侵及肾静脉,预后较差。我们建立的肿瘤模型现已稳定传至第4代,平均成瘤率超过40%,第1代达100%,以后各代稳定在40%。本模型荷瘤鼠的潜伏期及倍增时间在各代之间表现较均一,潜伏期在45~60d左右,平均50d。移植肿瘤在裸鼠体内一般要经过潜伏期后才开始生长,接种早期肿瘤细胞大部分坏死吸收,以后随肿瘤血管生成,受体的基质及血管长入,残留的肿瘤细胞增生,出现可见的肿块。这一时期一般为2周至3个月,不同肿瘤的移植瘤潜伏期并不一致,潜伏期可随传代过程而有所缩短,但肿瘤的生长特点却在个代之间保持稳定。研究未发现肿瘤的恶性程度与潜伏期的关系。
人肿瘤异体移植裸小鼠模型可模拟人癌体内的自然生长过程,已广泛应用于人类肿瘤的基础理论和临床治疗的实验。笔者建立的这一肾母细胞瘤异体移植瘤模型可用于肾母细胞瘤化疗、 基因治疗、 药物诱导治疗等各方面,为该肿瘤的进一步深入研究提供了一个较为理想的模型。
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