P2 5′AAGCTTCCGGGGCCGTCCCCGCGGGCG 3′可以扩增ICPO 中266bp序列。
1个探针:5′CCGGCTGGAGCCGCCGCACCCTGCT3′。
(2)PCR实验体系: 总反应体积为50μl,模板10μl (0.25-1.0μg)P1 1μl (20pmol/L);P2 1μl (20pmol/L); 4×dNTP 4μl(200μmol/L); 10×缓冲液5μl; AMV(逆转录酶) 2μl (50U); DW 26μl; 循环参数, 94℃变性2min后 94℃50s,60℃60, 72℃60s,循环40次后72℃延伸5min。
3、扩增产物的鉴定:
(1)琼脂糖凝胶电泳染色法:取10μl PCR扩增产物加4μl 样品缓冲液,混匀后加样2%琼脂糖凝胶板,70V电泳15-20min,EB染色5min。紫外灯下观察扩增条带。
(2)Southern印迹杂交法:用32P标记的特异性探针检测PCR产物,方法同上。
总之,在HSV感染性疾病的临床诊断中,PCR能对前病毒或潜伏期低复制的HSV特异性靶DNA片段进行扩增检测,远较DNA探针敏感,并能在血清中抗体出现前就可以检出。因此,PCR无论是作为基础研究手段,还是作为临床检验诊断方法,均具有广阔的前景。
五、病理组织学诊断
细胞内水肿,基底层形成大水疱,病灶周围有多核巨细胞浸润,特别是多核白细胞与淋巴细胞充斥于病灶中间。
【治疗措施】
本病有自限性,约1-2周即可自愈。治疗的目的是防止下次复发。本病目前尚无特效药物,治疗原则为缩短病程,防止继发感染,减少复发。
下面介绍别人治疗疱疹方法供参考:
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